紫外可見分光光度計(jì)原理是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見輻射光后，發(fā)生了電子能級躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，它對光能的吸收是不一樣的，因此，每一種物質(zhì)都有自己獨(dú)特的、固定的吸收光譜曲線，可以根據(jù)吸收光譜的某些特征波長在吸收高度處辨別或測定物質(zhì)的含量，這是分光光度法定性和定量分析的基礎(chǔ)。 　　

(1)預(yù)熱是保證儀器準(zhǔn)確穩(wěn)定的重要步驟。 　　

(2)試管的潔凈度直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因此，應(yīng)清洗試管。用自來水反復(fù)沖洗用過的試管，用蒸餾水沖洗，倒置在濾紙片上，干燥后回收試管。如有必要，應(yīng)對試管進(jìn)行更精細(xì)的處理，如用濃硝酸或鉻酸洗液浸泡，然后沖洗。 　　(3)比色皿與分光光度計(jì)應(yīng)配套使用,否則會引起較大的實(shí)驗(yàn)誤差.比色皿不能單個(gè)調(diào)換1.37200型光柵分光光度計(jì)的使用注意事項(xiàng)。 　　

(4)比色皿內(nèi)盛液應(yīng)為其容量的2/3,過少會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,過多易在測量過程中外溢,污染儀器.比色皿中試樣裝入量應(yīng)為2/3～3/4之間。 　　

(5)拿放比色皿時(shí),應(yīng)持其"毛面",杜絕接觸光路通過的"光面".如比色皿外表面有液體,應(yīng)用綢布拭干,以保證光路通過時(shí)不受影響。 　　

(6)如果待測溶液的濃度過大，應(yīng)選用光學(xué)直徑較短的試管，一般應(yīng)使紫外可見分光光度計(jì)的吸光度讀數(shù)在0.1 ~ 0.8的范圍內(nèi)為宜。由于測定空白、標(biāo)準(zhǔn)品和待測溶液時(shí)使用相同光學(xué)直徑的試管，所以不必考慮光學(xué)直徑變化所造成的影響。

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